各位老铁们好,相信很多人对mrs培养基都不是特别的了解,因此呢,今天就来为大家分享下关于mrs培养基以及Mrs培养基要加多少碳酸钙的问题知识,还望可以帮助大家,解决大家的一些困惑,下面一起来看看吧!
MRS培养基上培养什么菌
MRS培养基是乳酸菌的选择性培养基,适用于乳杆菌、乳球菌、双歧杆菌、肠球菌等,加了
CaCO3
的MRS培养基可以将产乳酸的菌株分选出来。此外,MRS不适用对革兰氏阴性菌的培养。
MRS肉汤培养基灭菌时间
成立时间 2019-12-31。
MRS肉汤培养基(Lactobacilli MRS Broth),是弱选择性培养基,支持乳酸菌的旺盛生长。
工作原理:蛋白胨提供氮源。牛肉浸粉和酵母提取物作为维生素来源。葡萄糖是可发酵的碳水化合物。培养基的微酸性环境,有利于乳酸杆菌的生长。乙酸钠和柠檬酸铵是选择剂,同时也是能量物质。乙酸钠对革兰氏阴性细菌和霉菌有抑制作用,但对乳酸杆菌无影响。硫酸镁和硫酸锰提供代谢必需的离子。司班80或吐温80是非离子型表面活性剂,辅助乳杆菌对营养物质的利用。
MRS培养基用途:
MRS肉汤培养基根据DeMan、Rogosa和Sharpe法用于各种材料中乳酸菌菌种的增菌、培养和分离。
乳酸菌MRS肉汤和MRS琼脂培养基(MRS固体培养基)也能用于乳杆菌鉴定中的检测实验。
MRS 肉汤培养基是什么
中文名MRS肉汤
菌种乳酸菌
英文名MRS Broth
用途:用于乳酸菌增菌培养
配方:(g/L)
蛋白胨10.0
肉膏10.0
酵母浸粉 5.0
葡萄糖20.0
磷酸氢二钾 2.0
柠檬酸氢二铵 2.0
乙酸钠5.0
硫酸镁0.58
硫酸锰0.25
半胱氨酸0.5
吐温801.0
pH值6.2-6.4
原理:蛋白胨、肉膏、酵母浸粉提供氮源、维生素、生长因子;葡萄糖为可发酵糖类;磷酸氢二钾为酸碱缓冲剂;柠檬酸氢二铵、硫酸镁、硫酸锰、吐温-80和乙酸钠为培养各种乳酸菌提供生长因子,其成分还能抑制某些杂菌。
mrs培养基如何配制
MS培养基的配制包括以下步骤。培养基母液的配制和保存 MS培养基含有近30种营养成分,为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量,可将培养基中的各种成分,按原量的20倍或200倍分别称量,配成浓缩液,这种浓缩液叫做培养基母液。
MS培养基的配制步骤
植物组织培养中常用的一种培养基是MS培养基。
编辑本段MS培养基的配制步骤
这样每次使用时,取其总量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL),加水稀释,制成培养液。现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出,供配制时使用。
大量元素(母液Ⅰ) mg/L NH4NO3 33 000 KNO3 38 000 CaCl2·2H2O 8 800 MgSO4·7H2O 7 400 KH2PO4 3 400
微量元素(母液Ⅱ) KI 166 H3BO3 1 240 MnSO4·4H2O 4 460 ZnSO4·7H2O 1 720 Na2MoO4·2H2O 50 CuSO4·5H2O 5 CoCl2·6H2O 5
铁盐(母液Ⅲ) FeSO4·7H2O 5 560 Na2-EDTA·2H2O 7 460
有机成分(母液Ⅳ)ⅣA 肌醇 20 000 ⅣB烟酸 100 盐酸吡哆醇(维生素B6) 100 盐酸硫胺素(维生素B1) 100 甘氨酸 400
以上各种营养成分的用量,除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外,其余的均为200倍浓缩液。
上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液。
其中,母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是:每种母液中的几种成分称量完毕后,分别用少量的蒸馏水彻底溶解,然后再将它们混溶,最后定容到1 L。
母液Ⅲ的配制方法是:将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中,边加热边不断搅拌使它们溶解,然后将两种溶液混合,并将pH调至5?5,最后定容到1 L,保存在棕色玻璃瓶中。各种母液配完后,分别用玻璃瓶贮存,并且贴上标签,注明母液号、配制倍数、日期等,保存在冰箱的冷藏室中。
MS培养基中还需要加入:2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、萘乙酸(NAA)、6-苄基嘌呤(6-BA)等植物生长调节物质,并且分别配成母液(0?1 mg/mL)。其配制方法是:分别称取这3种物质各10 mg,将2,4-D和NAA用少量(1 mL)无水乙醇预溶,将6-BA用少量(1 mL)的物质的量浓度为0.1 mol/L的NaOH溶液溶解,溶解过程需要水浴加热,最后分别定容至100 mL,即得质量浓度为0?1 mg/mL的母液。
配制培养液 用量筒或移液管从各种母液中分别取出所需的用量:母液Ⅰ为50 mL,母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA和ⅣB各5 mL。再取2,4?D 5 mL、NAA 1 mL,与各种母液一起放入烧杯中。
编辑本段MS培养基配制培养液时的注意事项
配制培养液时应注意: ①在使用提前配制的母液时,应在量取各种母液之前,轻轻摇动盛放母液的瓶子,如果发现瓶中有沉淀、悬浮物或被微生物污染,应立即淘汰这种母液,重新进行配制; ②用量筒或移液管量取培养基母液之前,必须用所量取的母液将量筒或移液管润洗2次; ③量取母液时,最好将各种母液按将要量取的顺序写在纸上,量取1种,划掉1种,以免出错。溶化琼脂 用粗天平分别称取琼脂9 g、蔗糖30 g,放入1 000 mL的搪瓷量杯中,再加入蒸馏水750 mL,用电炉加热,边加热边用玻璃棒搅拌,直到液体呈半透明状。然后再将配好的混合培养液加入到煮沸的琼脂中,最后加蒸馏水定容至1 000 mL,搅拌均匀。 需要注意的是,在加热琼脂、制备培养基的过程中,操作者千万不能离开,否则沸腾的琼脂外溢,就需要重新称量、制备。此外,如果没有搪瓷量杯,可用大烧杯代替。但要注意大烧杯底的外表面不能沾水,否则加热时烧杯容易炸裂,使溶液外溢,造成烫伤。调pH 用滴管吸取物质的量浓度为1 mol/L的NaOH溶液,逐滴滴入溶化的培养基中,边滴边搅拌,并随时用精密的pH试纸(5.4~7.0)测培养基的pH,一直到培养基的pH为5.8为止(培养基的pH必须严格控制在5.8)。培养基的分装 溶化的培养基应该趁热分装。分装时,先将培养基倒入烧杯中,然后将烧杯中的培养基倒入锥形瓶(50 mL或100 mL)中。注意不要让培养基沾到瓶口和瓶壁上。锥形瓶中培养基的量约为锥形瓶容量的1/5~1/4。每1 000 mL培养基,可分装25~30瓶。培养基分装完毕后,应及时封盖瓶口。用2块硫酸纸(每块大小约为9 cm×9 cm)中间夹1层薄牛皮纸封盖瓶口,并用线绳捆扎。最后在锥形瓶外壁贴上标签。
LBS培养基和MRS琼脂培养基的区别
LBS用途:用于乳酸菌检测和分离培养
配方:
原理:
胰酪蛋白胨、酵母浸粉提供氮源、维生素、生长因子;葡萄糖为可发酵糖类;磷酸氢二钾为酸碱缓冲剂;柠檬酸铵、硫酸镁、硫酸锰、硫酸亚铁和乙酸钠为培养各种乳酸菌提供生长因子,其成分还能抑制某些杂菌;琼脂是培养基的凝固剂。
MRS琼脂培养基用途:用于食品中乳酸菌总数测定
配方:
原理:
蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉提供氮源、维生素、生长因子;葡萄糖为可发酵糖类;磷酸氢二钾为酸碱缓冲剂;柠檬酸氢二铵、硫酸镁、硫酸锰、吐温-80和乙酸钠为培养各种乳酸菌提供生长因子,其成分还能抑制某些杂菌;琼脂是培养基的凝固剂。
为什么我配的MRS培养基很容易染上其他杂菌,有什么解决办法?跪求~~··
首先一定要保证灭菌措施是否有效(灭菌也是需要质量控制的,建议买一些灭菌指示卡,有生物的和化学的,在灭菌的同时一起放入观察灭菌是否合格)。鉴于你是灭菌后什么也没有操作,那么最大可能就是灭菌过程中的问题。MRS培养基需要121摄氏度灭菌15-20分钟。
另外观察一下杂菌的位置,如果杂菌均生长在培养基表面,则说明是空气中掉落进去的,考虑塞子是否能有效隔绝外界的细菌;如果杂菌是均匀生长在培养基的内部,那就是培养基灭菌不彻底了。
OK,关于mrs培养基和Mrs培养基要加多少碳酸钙的内容到此结束了,希望对大家有所帮助。
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作者:小黄同学,本文链接:https://www.vibaike.net/article/1930471.html